關(guān)于臨床意義不明KCNQ1基因突變的Minigene功能驗(yàn)證服務(wù)比價(jià)*******省婦幼保健院生殖醫(yī)學(xué)中心擬對臨床意義不明KCNQ1基因突變的Minigene功能驗(yàn)證進(jìn)行院內(nèi)詢比價(jià)***資格條件的供應(yīng)商前來參加。

一、項(xiàng)目概況： 1. 項(xiàng)目名稱：臨床意義不明KCNQ1基因突變的Minigene功能驗(yàn)證 2. 預(yù)算***元，交付周期21個(gè)工作日，各供應(yīng)商報(bào)價(jià)***的視為無效報(bào)價(jià)***采購需求： (1) 項(xiàng)目描述：

① 樣本：針對 1 個(gè) KCNQ1 基因可疑致病變異位點(diǎn)（c.1393+5(IVS10)G>A），開展 Minigene 構(gòu)建與功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。

② 檢測內(nèi)容：構(gòu)建雙載體 Minigene（WT/Mut），轉(zhuǎn)染細(xì)胞后進(jìn)行剪接模式分析，以明確突變位點(diǎn)對剪接的影響，驗(yàn)證其致病性。
(2) 技術(shù)要求：

① Minigene 構(gòu)建：使用雙載體（含野生型和突變型插入片段），按照標(biāo)準(zhǔn)分子克隆流程完成序列構(gòu)建與測序驗(yàn)證。

② 功能實(shí)驗(yàn)：將構(gòu)建的載體轉(zhuǎn)染 HEK293 或等同細(xì)胞系，提取 RNA，進(jìn)行 RT-PCR 與 Sanger 測序，分析剪接模式。

③ 數(shù)據(jù)分析：提供剪接產(chǎn)物電泳條帶、序列比對結(jié)果、外顯子跳躍/錯(cuò)配剪接比例及其功能解釋。
(3) 項(xiàng)目交付要求：

① 結(jié)果文件：包括構(gòu)建載體測序文件、RT-PCR 原始數(shù)據(jù)、電泳圖、測序峰圖、剪接模式分析報(bào)告。

② 圖表展示：包括 Minigene 構(gòu)建流程圖、剪接產(chǎn)物圖、電泳條帶圖、突變對剪接影響的示意圖等。
(4) 質(zhì)量控制要求： 要求所有載體序列經(jīng)雙端測序驗(yàn)證準(zhǔn)確無誤；RT-PCR 需設(shè)置陰陽性對照；實(shí)驗(yàn)重復(fù)至少 2 次；結(jié)果可重復(fù)性一致。

二、需要提交的資料： 符合條件的供應(yīng)商需提交下列資料（所有材料須加蓋公章）： 1. 資質(zhì)證書復(fù)印件（有效的營業(yè)執(zhí)照、稅務(wù)登記證、組織機(jī)構(gòu)***“三證合一”的營業(yè)執(zhí)照）; 2. 被委托人身份證原件及復(fù)印件; 3. ***/事業(yè)單位******、電子郵箱; 4. 報(bào)價(jià)***擬，需分項(xiàng)報(bào)價(jià)*** 過往的同類業(yè)績案例及相關(guān)復(fù)印件（若有）。

三、相關(guān)要求及時(shí)間、地點(diǎn)： 1.各供應(yīng)商將相關(guān)材料及報(bào)價(jià)***5年***月***日17:00前提交至***省婦幼保健院***樓生殖醫(yī)學(xué)中***樓導(dǎo)診臺或發(fā)送至郵箱kezhh@aliyun.com。
2.聯(lián)系人：*** ；聯(lián)系電話：***885。
3.中標(biāo)方式：本次詢比為最低評標(biāo)價(jià)***低到高依次列為中標(biāo)候選人。
***省婦幼保健院 ******月***日